天麻钩藤饮新剂型的研究

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天麻钩藤饮(TGD)由天麻、栀子、黄芩、桑寄生、杜仲、益母草、夜交藤、朱茯神各9g,钩藤(后下)、川牛膝各12g,石决明18g(先煎)组成。其具有平肝熄风、清热活血、补益肝肾等作用。主要用于肝阳偏亢,肝风上扰引起的头痛、眩晕、失眠等症,是临床公认的有效治疗高血压的名方。然而,天麻钩藤饮的传统入药方式即汤剂口服量大,味苦涩,携带不方便,且须临时煎制,限制了临床应用。因此,将其开发成中药新剂型势在必行。本课题在保证天麻原料质量的前提下,对天麻钩藤饮进行了一系列的基础研究,为天麻钩藤饮新剂型的研究与开发奠定了基础。具体研究内容包括以下几个方面:   1.天麻原料的质量控制研究:主要从天麻的干燥工艺和采收期两个方面对天麻进行质量控制。在天麻干燥工艺方面,采用自然干燥、微波干燥、真空冷冻干燥、鼓风干燥、真空干燥等方法对天麻进行干燥,观察天麻片外观形态,同时采用高效液相色谱法(HPLC)测定天麻素含量。通过上述两个指标对天麻干燥工艺进行筛选,并对鼓风干燥和微波干燥进行深一步研究,确定天麻的最佳干燥工艺为:将鲜天麻洗净,于蒸锅中蒸制30min,取出晾干,切成2~3mm厚的薄片,于80℃进行鼓风干燥。在采收期方面,对比了冬天麻与春天麻发现:春天麻含水量较冬天麻高,冬天麻中天麻素含量较春天麻高。因此,天麻的采收最好在冬季。   2.分煎与合煎液中成分的对比研究:分别对天麻钩藤饮分煎与合煎液进行萃取分离,采用薄层色谱法对药材中各有效成分的分布情况进行分析,结果表明分煎与合煎液无明显差别。   3.天麻钩藤饮提取、除杂工艺研究:通过文献检索确定了天麻和钩藤药材的提取工艺;建立了用紫外-可见分光光度法检测黄芩总黄酮的分析方法,在浓度范围2~12μg/mL,黄芩总黄酮的浓度与吸光度呈良好的线型关系,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,得线性回归方程为:A=0.063C+0.0338,R2=0.9996。使用该方法专属性强、精密度高、准确度高,满足试验要求,可以用来测定黄芩总黄酮的含量。以浸膏收率和黄芩总黄酮含量为指标,采用正交实验,优选了余下药材的提取工艺。因粗提后固形物含量较高,分别采用醇沉法和高速离心法对提取液进行进一步的除杂,结果表明,醇沉法能够有效地降低固形物收率的同时,并能较好的保留有效成分,且70%乙醇的除杂效果最佳。   4.药效学研究:选择了两个药效指标即天麻钩藤饮中间体(即天麻钩藤饮提取物)对小鼠毛细血管通透性的影响和天麻钩藤饮中间体对大鼠血小板聚集功能的影响来进行药效的验证。通过天麻钩藤饮中间体对小鼠毛细血管通透性的影响发现:蒸馏水组伊文思蓝的值为2.314±0.307μg/100mg,高、中、低剂量组伊文思蓝的均值依次是4.313±0.203、4.061±0.403、2.621±0.403μg/100mg。与蒸馏水组相比,高、中、低剂量组伊文思蓝的通透量均有所提高。天麻钩藤饮中间体对大鼠血小板聚集功能的影响得出:蒸馏水组血小板聚集时间为13.4±1.3s,高中低剂量组的聚集时间分别是:42.5±2.7s、40.9±2.2s、36.1±4.0s。与蒸馏水组相比,各剂量组血小板的凝聚时间均有所延长:低剂量组将血小板聚集时间延长了22.7s;中剂量组延长了27.5s;高剂量组延长了29.1s。
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