金丝草植物资源质量评价研究

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金丝草植物资源丰富,其植物资源的开发利用一直是亟待解决的问题。本课题组前期发现金丝草提取物对14种病原菌有一定的抑制作用。化学成分分离及抑菌活性研究证实,以木犀草素-6-C-β-波依文糖-7-O-β-葡萄糖、异夏佛塔苷、夏佛塔苷为代表的黄酮碳苷类化合物抑菌效果较好,表明黄酮类化合物可能是其发挥抑菌作用的主要活性成分。因此,本课题进一步对金丝草植物资源品质进行研究,建立金丝草指纹图谱,并对提取物中已发现的含量大、活性强的的三个黄酮碳苷类的含量进行测定,同时对金丝草中的重金属残留进行分析,为金丝草的植物资源开发利用提供理论依据。金丝草HPLC指纹图谱以金丝草60%乙醇提取物作为供试品。色谱条件:DikmaDiamonsil 柱(C18 250×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%乙酸水,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,进样量20μL,检测波长254 nm,梯度洗脱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》对福建省不同地市的14批金丝草进行谱图分析。以夏佛塔苷为参照峰,确定14个稳定的共有峰。相似度计算结果表明,有12批样品的相似度在0.90以上,有2批样品的相似度在0.80-0.90之间。方法学考察结果显示,稳定性、精密度、重复性的相对峰面积和相对保留时间的RSD值均在5%以下,符合方法学考察要求。因此,本研究所建立的HPLC指纹图谱可作为金丝草在植物源农药研究开发中的批次样品稳定性和质量差异控制的参考依据。本研究采用HPLC法对14批金丝草中异夏佛塔苷、夏佛塔苷、木犀草素-6-C-β-波依文糖-7-O-β-葡萄糖3个黄酮类化合物进行定量分析。结果显示,三种化合物中木犀草素-6-C-β-波依文糖-7-O-β-葡萄糖在金丝草中的平均含量最高,为4.192mg·g-1,在采集自宁德霞浦县的金丝草中含量最高,含量最低的来自福州永泰县。夏佛塔苷的平均含量为2.037mg·g-1,含量最高和最低的金丝草分别来自龙岩市长汀县和龙岩市雁石镇。异夏佛塔苷的平均含量最低,为1.953 mg·g-1,在采自龙岩长汀县的金丝草中含量最高,在福州罗源县的金丝草中含量最低。方法学考察和加样回收率实验表明,该方法准确、快速、可靠。本研究还采用原子吸收分光光谱法和原子荧光光谱法对14个不同产地的金丝草样品进行铅(Pb),镉(Cd),砷(As)和汞(Hg)等4种重金属元素的含量测定。结果显示,金丝草Pb和Cd的含量较高,平均含量分别为4.976 mg·kg-1 0.290 mg·kg-1。其中来自福州市闽侯县的金丝草中的Pb含量高达8.438 mg·kg-1。As和Hg的平均含量相对较低,分别为0.036mg·kg-1和2.667×10-3mg·kg-1。本研究建立了快速、简便,适合于金丝草中重金属残留检测的分析方法。
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