复制缺陷型腺病毒是一种很好的基因治疗载体,但其传递特异治疗基因到靶细胞时仍存在不足。我们研究的重点是构建一套完整的腺病毒载体平台系统,使一些对肿瘤细胞具有特异识别作用的碱基序列可任意加入到腺病毒载体中,增强病毒载体对肿瘤细胞的特异识别,提高病毒载体的转导效率。针对腺病毒载体纤维蛋白中HI-环(HI-loop)可加入外源片段这一特点,本实验利用市售的腺病毒载体系统构建一个完整的腺病毒载体平台及一系列易于操作的穿梭载体。通过此载体系统可以将编码任意不大于100个氨基酸残基的碱基序列放入腺病毒载体的HI-loop中,以此增加病毒载体的靶向性。同时,利用此载体平台还可将本实验的检测基因(luciferase)换为任意的功能基因,以便使增加了靶向性的腺病毒载体能更好的应用于肿瘤的基因治疗。利用构建好的载体平台将碱基编码的RGD(Arg-Gly-Asp)小肽放入腺病毒载体的HI-loop中。扩增、纯化后的重组腺病毒Ad-luc和Ad-luc-RGD分别感染咽部鳞状上皮癌细胞FaDu,发现后者的感染效率是前者的20倍。证明我们构建的腺病毒载体平台系统正确有效,为腺病毒对特定细胞,尤其是对肿瘤细胞的特异识别开辟了一条新的技术路线,为基因治疗载体的设计和改进提供了有力的帮助和更广阔的应用前景。