百草枯引起小鼠神经干细胞损伤与小胶质细胞活化和内质网应激的关系研究

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目的百草枯是一种被广泛使用的除草剂。流行病学研究发现暴露于百草枯可以增加人群神经退行性疾病如帕金森病的发病风险。其神经毒作用机制主要是损伤多巴胺能神经元。而百草枯对具有分化成神经元功能的神经干细胞影响的研究尚不全面,本研究旨在探讨百草枯对神经干细胞的影响以及与小胶质细胞活化和内质网应激的关系。方法 6到8周龄雌性SPF级野生型C57/BL6小鼠,随机分成对照组、2mg/kg和20mg/kg百草枯染毒组,皮下注射给药,每组各6只。根据百草枯对中枢神经系统影响特点,实验设计为百草枯染毒两次,时间间隔一周,第二次染毒一周后取材,对其神经干细胞(主要位于齿状回颗粒下层(SGZ区)和前脑侧脑室室下区(SVZ区))的数量凋亡增殖情况和小胶质细胞数量活化状态内质网应激用流式细胞术进行检测。结果 20mg/kg百草枯可降低神经干细胞(CD45-sox2+)的数量(P<0.05),但不影响神经干细胞Caspase3和Bcl-2的表达;可降低SVZ区神经干细胞Ki67的表达(P<0.05),但SGZ区神经干细胞Ki67的表达有下降趋势(差异无显著性);2mg/kg百草枯染毒后,上述指标均无变化。两组剂量百草枯均不影响小胶质细胞(CD45low CD11b+F4/80+)的数量。20mg/kg百草枯可增加小胶质细胞表面主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(I-A)的表达(P<0.0001);2mg/kg百草枯不影响I-A的表达。20mg/kg百草枯可增加SGZ区小胶质细胞PERK和XBP1的表达(P<0.05),但不影响SVZ区小胶质细胞PERK和XBP1的表达;而2mg/kg百草枯除降低SVZ区小胶质细胞PERK的表达(P<0.05)外,对SGZ区小胶质细胞PERK的表达以及SGZ区和SVZ区小胶质细胞XBP1的表达均无影响。上述数据表明,20mg/kg百草枯可降低神经干细胞的数量,其数量的降低是由于神经干细胞增殖减少而非凋亡;可增加I-A的表达,提示小胶质细胞活化和炎症反应的发生;此外,亦可引起小胶质细胞内质网应激。结论百草枯引起的神经干细胞减少与小胶质细胞活化和内质网应激存在相关性,提示小胶质细胞活化和内质网应激可能抑制神经干细胞增殖从而造成神经干细胞数量的降低。
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