【摘 要】
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为获得堆肥用高产高温纤维素酶菌株,从云南昆明郊区3个堆肥样品中筛选分离分解纤维素能力好的高温细菌.采用羧甲基纤维素钠作碳源的培养基,初步筛选出纤维素酶比活值大的
【出 处】
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第七届全国微生物资源学术暨国际微生物系统与分类学研讨会
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为获得堆肥用高产高温纤维素酶菌株,从云南昆明郊区3个堆肥样品中筛选分离分解纤维素能力好的高温细菌.采用羧甲基纤维素钠作碳源的培养基,初步筛选出纤维素酶比活值大的15株菌株,用DNS方法复筛,获得酶活最大的菌株YN27,进行生理生化试验及其16SrDNA基因序列分析,确定该菌株为革兰氏阳性菌,有芽孢,能发酵产酸,能分解硝酸盐,明胶和淀粉,伏普试验呈阳性,结合菌株16SrDNA基因序列分析结果,鉴定菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus).菌株YN27发酵48h,对其纤维素酶的粗酶液进行分析,粗酶液在以CMC-Na为底物时,最适温度为45℃,最适pH为7.2,Km值为0.0501 g/ml,Vmax为0.213 mg/ml.min,酶活为59.1 U/mL.在菌株液体培养基中分别添加0.05g/L无机盐CaCl2、FeSO4、MgSO4、ZnSO4、CuSO4、NaCl,发酵培养48hr测定纤维素酶酶活,Na+,Zn2+可促进碱性纤维素酶的合成,Fe2+,Mg2+则明显对酶活有一定的抑制作用,Cu2+、Ca2+对酶活影响不显著.本研究为该菌株进一步应用于高纤维秸秆肥料腐熟添加菌剂奠定了基础.
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