【摘 要】
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目的 探讨人诱导性多能干细胞(iPSC)向表皮样干细胞定向分化的可行性.方法 以经过灭活处理的小鼠胚胎Fb(MEF-CF1-01)作为滋养层,将人iPSC接种于其上,加入胚胎干细胞完全
【机 构】
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330006 南昌大学第一附属医院烧伤科
【出 处】
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第十届全国烧伤救治专题研讨会暨福建省第八次烧伤外科学术研讨会
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目的 探讨人诱导性多能干细胞(iPSC)向表皮样干细胞定向分化的可行性.方法 以经过灭活处理的小鼠胚胎Fb(MEF-CF1-01)作为滋养层,将人iPSC接种于其上,加入胚胎干细胞完全培养液培养,Ⅳ型胶原酶消化法传代,倒置显微镜下观察人诱导性多能干细胞形态及生长状况并行碱性磷酸酶(AKP)染色.以胚胎干细胞不完全培养液悬浮培养iPSC,观察拟胚体形成能力.将人人iPSC接种于铺布于6.7L细胞培养板底的人羊膜上培养.另将培养于未铺布羊膜6.7L培养板上的iPSC作为对照组.观察羊膜诱导后iPSC形态学变化,免疫细胞化学染色法检测细胞整合素B,和细胞角蛋白19(CK19)表达.结果 人iPSC在胚胎干细胞完全培养液中呈典型的干细胞克隆状生长,边界清楚,细胞增殖旺盛.细胞AKP染色阳性,在无滋养层条件下悬浮培养可形成拟胚体.羊膜诱导培养4d后iPSC形成干细胞克隆,部分细胞整合素p.和CK19表达阳性.对照组大量细胞死亡,未见p,整合素和CKl9阳性表达.结论 人iPSC在羊膜诱导下可定向分化为表皮样干细胞,具有作为皮肤组织工程种子细胞新来源的潜能.
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