小鼠Dazl基因的克隆和真核表达载体构建

来源 :中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ln86119
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  小鼠Dazl (deleted in azoospermia like)是DAZ基因家族的成员之一,编码RNA结合蛋白.Dazl基因在生殖细胞中特异表达,参与调节生殖细胞的发育和分化,是精子发生过程中减数分裂的主要调控因子.Dazl基因突变或不表达将导致精子发生过程中减数分裂障碍和雄性不育.研究Dazl基因及其编码蛋白对探索配子发生和成体生殖缺陷及修复具有重要意义.克隆小鼠Dazl基因编码区CDS,与pEGFP-C1拼接,构建成Dazl-C1载体,转染真核细胞验证Dazl蛋白的定位及其超表达引起的细胞的表型及基因表达变化.将Dazl基因编码区CDS与逆转录病毒载体pMSCV拼接,构建Dazl-pMSCV载体,转染PT67细胞获得编码Dazl蛋白的病毒.结果显示,PCR克隆得到的Dazl基因CDS序列与NCBI上公布的序列完全一致.
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