超声联合新型微泡复合物体外增强基因转染

来源 :1st International Symposium on Ultrasound Molecular Imaging | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenwoyu
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  目的 探讨超声联合自制新型微泡复合物体外增强基因转染的效果.方法 分别将"脂氟显"微泡和阳离子脂质体纳米粒的PEG末端进行生物素化修饰,再通过亲和素的桥连作用将二者耦连起来,形成阳离子纳米粒-微泡复合物,制备一种新型微泡复合物.光镜和扫描电镜观察新型微泡复合物的形态,同时考察它的稳定性.凝胶电泳阻滞实验观察其载基因能力.将大鼠肝星状细胞接种在六孔板中,随机分为5组:①单纯质粒组(P);②质粒+阳离子脂质纳米粒(P+L)组;③质粒+"脂氟显"微泡组(P+M);④质粒+新型微泡复合物组(P+NLM);⑤质粒+新型微泡复合物+超声组(P+NLM+U)组.荧光显微镜及流式细胞仪检测增强型绿色荧光蛋白在细胞内的表达及转染效率;MTT法检测该方法对细胞生长活性的影响.结果 新型微泡复合物形态规则,稳定性好.凝胶电泳阻滞实验显示当新型微泡复合物与DNA的质量比在10以上时,可将DAN阻滞.P+LM+U组的绿色荧光强度及转染率均高于其他各组,约为30%,其次是P+LM组、P+L组、P+M组、P组,各组均对细胞活性无明显影响.结论 超声联合新型微泡复合物可提高基因在体外培养肝星状细胞的转染效率,并对细胞活性无明显影响,为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略.
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