猪传染性胃肠炎病毒n基因的原核表达及重组蛋白的免疫活性分析

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenming88623
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以猪传染性胃肠炎病毒标准华毒株H的n基因重组质粒pMD1-TN为模板,通过PCR扩增出1149bp大小的n基因,然后将其亚克隆到pET-30a原核表达载体,成功地构建了TGEV n基因的原核表达载体pET30a-N,重组质粒转化E.coli BL21感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,经SDS2PAGE分析表明TGEV N蛋白在大肠杆菌中获得了融合表达。通过Western blot试验检测表明:重组N蛋白与TGEV阳性血清具有很强反应性重组N蛋白的高免血清能够识别TGEV的N蛋白,说明利用大肠杆菌表达的TGEV N蛋白具有良好的免疫活性。
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