【摘 要】
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钙调蛋白(calmodulin,CaM)是一种在真核生物中广泛存在的单聚体钙离子结合蛋白,具有介导细胞增殖与凋亡、传递胞内信号、调节免疫反应、调控新陈代谢等生物学功能.花刺参
【机 构】
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中国科学院南海海洋研究所 热带海洋生物资源与生态实验室 广东省应用海洋生物重点实验室 广州 510301
【出 处】
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“全球变化下的海洋与湖沼生态安全”学术交流会
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钙调蛋白(calmodulin,CaM)是一种在真核生物中广泛存在的单聚体钙离子结合蛋白,具有介导细胞增殖与凋亡、传递胞内信号、调节免疫反应、调控新陈代谢等生物学功能.花刺参(Stichopus monotuberculatus)俗称“黄肉参”,是我国热带海参中具有代表性的高经济价值品种,目前其人工繁殖技术已经攻克,具有很大的增养殖开发潜力.通过在分子水平对花刺参的各种生命现象如自溶、再生、骨片生成、先天免疫反应的研究,可以为未来人工增养殖花刺参遇到的问题提供理论基础. 本研究中,我们通过分析花刺参EST文库获得CaM的中间片段,通过3’-、5’-RACE技术获得花刺参CaM的cDNA全长,并通过基因组PCR获得其基因全序列.花刺参CaM cDNA全长1394bp,其中包括一个编码150 a.a的450 bp开放读码框.序列分析表明花刺参CaM 蛋白包含四个EF臂,其氨基酸序列与不同物种对比均高度保守.花刺参CaM基因全长11852bp,包括6个外显子和5个内含子,和哺乳动物CaM的基因结构一致.定量PCR分析表明,花刺参CaM基因在呼吸树中表达量最高,其次是体腔细胞和肠,而体壁中表达量最低.在原代分离的花刺参体腔细胞中,弧菌、LPS、poly(I：C)处理均会上调CaM的mRNA表达.同时使用CaM抑制剂处理,能阻断花刺参体腔细胞中PAMPs诱导的一氧化氮释放,表明了CaM在花刺参中,是一个重要的免疫调控基因.
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