胶原蛋白特异结合性重组人IL-10的克隆、表达及其拮抗纤维化的初步研究

来源 :第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxy556
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  白细胞介素10 (IL-10)是一种多效细胞因子,在炎症、免疫反应以及在疾病的发生过程中发挥着重要的作用,CBD是能够特异性结合胶原蛋白的多肽序列.本文将胶原蛋白特异结合的导向肽CBD连接到IL-10的羧基端,以人外周血淋巴细胞cDNA为模板,扩增的PCR产物经克隆载体pMD20-T,连至原核表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),构建了pET-IL10-CBD表达载体的重组菌(pET-IL 10-CBD/BL21).SDS-PAGE分析表明:在19.5 kDa处有明显的深染新生蛋白带,占菌体总蛋白的35%.Western blot分析表明:诱导表达、分离纯化的目的蛋白能够与IL-10抗体特异结合,且纯化产物IL10-CBD具有与IL-10相同的生物学活性.
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