基因突变和拷贝数变异是遗传病发生的主要遗传学基础,也是遗传病检测的主要靶标。遗传病的复杂性伴随着基因突变数目多、类型广;类似地,基因拷贝数变异不仅表现为缺失和复制,而且缺失位置、大小以及复制倍数都呈现多样性。遗传变异的复杂性为遗传病的临床检测提出了技术挑战。中通量实时PCR技术是我们最近发展起来新一代实时PCR技术,利用荧光标记和熔点分析,可以在单个反应管内检测多个靶标。本文系统介绍了这一新技术的原理以及在遗传病检测中的应用。尤其围绕多重突变和基因拷贝数变异的例子详细介绍了该技术的具体应用。涉及的遗传病包括染色体非整倍体变异、α-地中海贫血、β-地中海贫血、脊髓肌肉萎缩症以及6-磷酸脱氢酶缺乏症等。利用中通量实时PCR技术,上述所有疾病都可以在1-2个反应管实现检测,检测反应在1～3小时内,仅需1～2步操作,使这些疾病的检测达到了前所未有的简便性和准确性。最后,本文将报告单管3小时内检测48个单核苷酸变异的实现,总之,中通量实时PCR技术从整体上提升了遗传病检测的水平,具有极大的推广应用价值。