【摘 要】
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目的:明确内质网应激(ERS)感受器转录激活因子6(ATF6)是否介导氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所诱导的巨噬细胞泡沫化和凋亡过程,并探讨可能的分子机制.方法:体外培养RAW264.7巨噬
【机 构】
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山东省高校动脉粥样硬化重点实验室,泰山医学院动脉粥样硬化研究所,泰安271000
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目的:明确内质网应激(ERS)感受器转录激活因子6(ATF6)是否介导氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所诱导的巨噬细胞泡沫化和凋亡过程,并探讨可能的分子机制.方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予ox-LDL(25、50和100mg/L)处理12、24和48h,或给予ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)处理12h作为阳性对照组,并采用siRNA技术沉默ATF6和内质网常驻分子伴侣糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)表达.结果:与TM相似，ox-LDL在蛋白和转录水平均明显上调GRP78和CHOP表达，且呈浓度和时间依赖性;免疫荧光细胞化学法和免疫印迹法均显示ox-LDL处理细胞中ATF6明显由胞浆向细胞核内转移。采用siRNA技术沉默ATF6后明显抑制。x-LDL所诱导的细胞凋亡和CHOP表达上调，且ATF6-siRNA可明显减轻巨噬细胞内脂质蓄积及ox-LDL所诱导CD36表达上调。另外，沉默ATF6下游分子伴侣GRP78(GRP78-siRNA)也可显著抑制ox-LDL所诱导的细胞内脂质蓄积及ox-LDL所诱导CD36蛋白表达上调，但对CD36mRNA水平没有明显影响。结论:(1)ERS感受器ATF6及其下游分子CHOP介导ox-LDL所诱导的巨噬细胞凋亡过程。(2)ATF6通过其下游分子伴侣GRP78增强对CD36蛋白的处理能力而介导ox-LDL所诱导的巨噬细胞内脂质蓄积。
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