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目的:建立兔耳增生性瘢痕动物模型,研究PRF对瘢痕增生的影响,探讨其作用机制.
方法:制备PRF及家兔耳皮肤软组织缺损创面模型,每只家兔双侧兔耳形成4个创面,随机选择一侧兔耳腹侧面的两个缺损创面为治疗组,敷PRF后轻加压包扎.对侧为对照组,常规敷科包扎.16只家兔共64个创面,其中治疗组32个,对照组32个.30天后取材.治疗组和对照组各组切取标本40份,20份做HE染色以及TGF-β1免疫组织化学染色,比较治疗组和对照组创面愈合平均时间、瘢痕生成率、瘢痕增生指数(HI)、TGF-β1表达情况.另各20份标本提取组织RNA,实时定量PCR检测两组瘢痕Ⅰ型胶原基因表达情况.
结果:创面愈合于术后14-18天,呈向心性爬行生长.瘢痕于术后20天左右时间逐渐形成.对照组瘢痕增生较明显,颜色呈皮肤色或微红,收缩不明显.治疗组瘢痕增生不明显,颜色接近皮肤色,收缩明显;治疗组和对照组的平均创面愈合时间分别为15.09±0.78天,16.91±0.86天,两组愈合天数之间差异有统计学意义(t=-10.274,P＜0.01);治疗组和对照组的瘢痕生成率分别为80.27±1.50％,80.70±1.70％,无统计学差异(t=-0.884,P=0.390);治疗组和对照组的瘢痕增生指数(HI)分别为2.18±0.50,2.92± 0.49,两组差异有统计学意义(t=-2.191,P＜0.05).TGF-β1的阳性表达主要呈现棕黄色染色,深染的棕黄色出现于成纤维细胞的胞浆内,表皮层也有较强的阳性表达信号,细胞外基质仅有轻微淡染.两组灰度值比较:治疗组为137.70±4.02,对照组为136.18±4.84,两组差异无统计学意义(T=-1.604,P=0.109);荧光实时定量PCR检测:治疗组2-△△CT值为2.62±2.82,对照组2-△△CT值为7.83±9.69,两者差异有统计学意义(t=-1.982,P＜0.05).
结论:PRF能够有效缩短创面平均愈合时间,降低瘢痕增生指数;PRF可能通过调控并降低增生性瘢痕Ⅰ型胶原mRNA的表达,抑制Ⅰ型胶原蛋白的合成而起到抑制瘢痕增生.