【摘 要】
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目的:观察LPS诱导HMGB1在肝实质细胞与枯否细胞的表达和细胞外释放.方法:培养瓶中分别培养原代肝实质细胞和枯否细胞,24 h后收获对照组和500 ng/ml LPS诱导组两种细胞,反复冻融,用半定量RT-PCR和Western blot法检测HMGB1-mRNA水平和HMGB1表达水平;接种原代肝实质细胞和枯否细胞于24孔板中,继续培养6 h、12 h、24 h和48 h,Western bl
【机 构】
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046000,长治医学院肝病研究所 030001,山西医科大学肝病研究所
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目的:观察LPS诱导HMGB1在肝实质细胞与枯否细胞的表达和细胞外释放.
方法:培养瓶中分别培养原代肝实质细胞和枯否细胞,24 h后收获对照组和500 ng/ml LPS诱导组两种细胞,反复冻融,用半定量RT-PCR和Western blot法检测HMGB1-mRNA水平和HMGB1表达水平;接种原代肝实质细胞和枯否细胞于24孔板中,继续培养6 h、12 h、24 h和48 h,Western blot法检测各时间点对照组和500ng/ml LPS诱导组培养液中HMGB1含量.
结果: LPS诱导24h后,与相应对照组比较,肝实质细胞和枯否细胞HMGB1-mRNA表达水平明显增强(t=31.32和45.90),HMGB1蛋白表达水平也明显增强(t=46.19和38.44);在6h、12 h、24 h和48 h各时间点,对照组两种细胞及诱导组肝实质细胞培养上清液中仅检测到少量HMGB1,延长培养时间,培养上清液中HMGB1含量均未见增多;与对照组比较,诱导组枯否细胞培养液中的HMGB1含量在6 h无显著增加(t=1.48),但培养随时间延长,其含量明显增高(F=42.74),且在12 h、24 h和48 h均明显高于对照组(t分别=21.95,32.39,44.16).
结论: LPS可诱导肝实质细胞和枯否细胞HMGB1表达增强,肝实质细胞不主动释放HMGB1,而枯否细胞能主动释放HMGB1到细胞外.
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