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研究目的：本研究选择高表达YAP1基因的胃癌细胞系BGC823作为研究对象,通过RNAi方法沉默YAP1基因表达来观察其对BGC823细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭等恶性生物学行为的影响,并探讨其相关分子机制.研究方法：采用脂质体转染法,分别将两个重组质粒和pRFP-C-RS空质粒转染至BGC823人胃癌细胞中,应用qRT-PCR方法检测重组质粒的干扰效率.采用qRT-PCR、Western blot 和细胞免疫荧光方法检测RNAi后BGC823胃癌细胞的YAP1 mRNA和蛋白表达量,筛选出沉默效率最高的YAP1 shRNA-BGC823细胞株.应用MTT比色法、平板克隆形成实验、划痕实验、Transwell迁移侵袭实验检测沉默YAP1基因的表达对BGC823胃癌细胞生物学特性的影响.采用Western-blot方法检测E-cadherin、Vimentin、α-catenin、B-catenin、MMP2、MMP9等EMT相关蛋白以及total-AKT和pho-AKT、total-ERK1/2和pho-ERK1/2、SP1和VEGF蛋白的表达的变化.研究结果：重组质粒介导的YAP1 shRNA有效沉默了BGC823胃癌细胞YAP1基因的mRNA和蛋白的表达.MTT和克隆形成实验结果显示,沉默YAP1基因的表达明显抑制了BGC823胃癌细胞的增殖能力和克隆形成能力；细胞划痕实验、Transwell迁移和Transwell侵袭实验结果结果显示明显抑制了其在体外的迁移和侵袭能力；.沉默YAP1基因的表达后,BGC823胃癌细胞中E-cadherin和α-catenin蛋白表达增加,而Vimentin、β-catenin和MMP9蛋白表达降低,MMP2表达无变化.沉默YAP1基因的表达后,BGC823细胞中total-AKT和total-ERK1/2蛋白表达无变化,但pho-AKT、pho-ERK1/2表达下调.沉默YAP1基因的表达后,BGC823细胞中VEGF蛋白表达降低,而SP1蛋白表达无明显变化.研究结论：沉默YAP1基因的表达能明显抑制BGC823胃癌细胞的增殖和克隆形成能力,其机制可能是通过抑制ERK1/2和PI3K-AKT信号通路的活性起作用；沉默YAP1基因可明显抑制BGC823胃癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与上调E-cadherin和α-catenin、下调Vimentin、β-catenin、MM]P9蛋白表达,进而抑制胃癌细胞的EMT有关.此外,沉默YAP1基因可明显下调VEGF表达,但对SP1表达无明显影响,提示YAP1基因对VEGF的调控可能主要是通过SP1以外的其他途径发挥作用.