【摘 要】
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为了探讨柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)早熟弱毒株(PTsx)能否诱导宿主细胞凋亡及其与强毒株(Tsx)对宿主细胞凋亡诱导作用的异同,采用原代鸡胚盲肠上皮细胞培养、Hoechst 333
【机 构】
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山西农业大学动物科技学院,山西太谷 030801
【出 处】
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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会
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为了探讨柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)早熟弱毒株(PTsx)能否诱导宿主细胞凋亡及其与强毒株(Tsx)对宿主细胞凋亡诱导作用的异同,采用原代鸡胚盲肠上皮细胞培养、Hoechst 33342/AnnexinV-FITC/PI 荧光染色和ELISA 等技术,对体外接种PTsx 低剂量,高剂量和Tsx 低剂量,高剂量宿主细胞的虫体感染率、细胞凋亡率和Caspase-3 酶活性进行了动态检测；采用Hochest 荧光染色法对体内接种PTsx 低剂量,高剂量和Tsx 低剂量,高剂量的鸡盲肠和肠腺上皮细胞凋亡率进行测定.结果显示：在体外培养的宿主细胞上接种E.tenella 后4h-72h,同剂量接种组之间虫体感染率差异不显著(P＞0.05),而120hTsx 组宿主细胞的虫体感染率极显著(P＜0.01)高于PTsx 组.在接种E.tenella 后4h,接种组的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率以及Caspase-3 吸光值均显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)低于对照组.接种E.tenella 后24h-120h,对照组的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率及Caspase-3 吸光值均显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)低于接种组.其中,接种后24h-72h,PTsx 和Tsx 同剂量接种组之间的早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率及Caspase-3吸光值差异不显著(P＞0.05),但接种后120h,PTsx 组早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率及Caspase-3 吸光值均极显著(P＜0.01)低于Tsx 同剂量组；体内接种E.tenella 后第5 天,接种组的盲肠和肠腺上皮细胞的凋亡率均极显著(P＜0.01)高于对照组；PTsx 组盲肠和肠腺上皮细胞凋亡率极显著(P＜0.01)低于同剂量Tsx 组.表明,E.tenella 早熟株和强毒株均可诱导宿主细胞凋亡,且在E.tenella 发育后期早熟株诱导宿主细胞凋亡的作用明显低于强毒株,早熟株与强毒株诱导其宿主细胞凋亡的能力随感染剂量增高而增强.
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