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根据牛布氏杆菌BM28保守序列设计引物和探针，建立了一种快速鉴定牛布氏杆菌的TaqMan实时荧光定量PCR方法。以梯度稀释的含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品，进行定量PCR反应。结果显示：5.0×105～5.0×101拷贝范围内定量PCR均有“S”型扩增曲线，检测灵敏度为50拷贝每微升。本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性和重复性好、方便经济的特性，在牛布氏杆菌的检测与鉴定中具有良好的应用前景。