【摘 要】
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目的 Th17 作为新发现的一类辅助性T 细胞亚群,其效应主要通过产生IL-17 实现.Th17 高表达趋化因子受体CCR6,与其唯一的高特异性配体CCL20 趋化因子成对,介导了Th17 的趋化.
【机 构】
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中南大学湘雅医院肾内科410008
【出 处】
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中华医学会肾脏病学分会2014年学术年会
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目的 Th17 作为新发现的一类辅助性T 细胞亚群,其效应主要通过产生IL-17 实现.Th17 高表达趋化因子受体CCR6,与其唯一的高特异性配体CCL20 趋化因子成对,介导了Th17 的趋化.研究发现,肾脏组织中CCL20 主要由肾小管间质的浸润细胞以及肾小管上皮细胞产生.此外有文献报道IL-17 可刺激气道上皮细胞产生CCL20.因此,本研究推测:IL-17 作为一种炎症介质可能刺激肾小管上皮细胞产生趋化因子CCL20,从而提示肾小管上皮细胞在炎症状态下尚具备趋化Th17 的潜能.方法 1.细胞培养:用完全培养基(10 ％胎牛血清、1 ％青霉素和链霉素的1:1DMEM/ F12 培养液)常规培养人肾小管上皮细胞(HK-2).2.IL-17 处理:随机分组,用梯度浓度(0,1,10,100ng/mL)的IL-17 刺激HK-2,分别于24h 收样行RT-PCR 检测,48h 收样行ELISA 检测,以研究剂量效应关系;随机分组,以10ng/mL IL-17 刺激HK-2 于不同时间(6,12,24,48h)终止处理,以研究时间效应关系.3.RT-PCR 分析:mRNA 相对表达量通过2-ΔΔC 表示,每组实验均至少重复3 次.4.ELISA检测:得到OD 值代入标准曲线回归方程以计算CCL20 浓度,每组实验均至少重复3 次.5.统计分析:所有数据以均数±标准差表示,采用SPSS17.0 统计分析软件进行数据处理.经正态性和方差齐性检验后,采用单因素ANOVA 用于判定显著性差异,P＜0.05 被认为有统计学意义.
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