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[目的]采用高效液相色谱串联质谱法,研究阿司匹林丁香酚酯(AEE)在犬体外和体内的代谢.[方法]采用Agilent 1200高效液相色谱串联Agilent 6410A三重四级杆质谱,以ESI为离子源.用差速离心法制备犬肝微粒体；用BSA法测定肝微粒体蛋白浓度；用肝微粒体配合NADPH生成系统体外孵育香豆素法,检测肝微粒体活性并优化孵育条件,体系中检出7-羟基香豆素(香豆素的代谢产物),则说明肝微粒体具有代谢酶活性.肝微粒体配合NADPH生成系统体外孵育代谢AEE,HPLC-ESI-MS/MS检测分析样品中AEE的代谢产物.6只Beagle犬按20 mg/kg的剂量空腹口服AEE片剂,于给药后0～72 h期间,共16个不同时间点采集血液制备血浆；同时,于给药后0 ～48 h期间收集尿液.HPLC-ESI-MS/MS检测分析血浆和尿液中的AEE代谢产物.[结果]AEE经体外、体内代谢共发现10个代谢产物.AEE在体外首先发生水解,代谢生成水杨酸(M1)和丁香酚(M2),丁香酚进一步发生Ⅰ相代谢生成3种产物(M3-M5),M3为5-(2-hydroxypropyl)-2-methoxyphenol,M4为3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid,M5为4-(1-hydroxyprop-2-en-1-yl)-2-methoxyphenol.AEE在Beagle犬体内也首先发生水解,在血浆中均检测到水杨酸(M1)和丁香酚(M2),而在尿液中仅检测到水杨酸(M1),在血浆和尿液中均检测到水杨酸的葡萄糖醛酸结合产物(M6),水杨酸的甘氨酸结合产物(M7,M8),丁香酚的葡萄糖醛酸结合产物(M9)和硫酸盐结合产物(M10),其中M7为甘氨酸的氨基与水杨酸的羧基缩合产物,M8为甘氨酸的羧基与水杨酸的羟基缩合产物.[结论]AEE在体外发生水解和氧化等Ⅰ相代谢反应,生成水杨酸、丁香酚,以及丁香酚的3种氧化代谢产物.给药后,AEE在犬体内首先发生Ⅰ相代谢,水解生成水杨酸和丁香酚,水杨酸以原型和Ⅱ相代谢的结合产物排出体外；丁香酚则在体内快速发生Ⅱ相代谢,以致仅在血浆中检出痕量的丁香酚,而在尿液中未检测到,以及在血浆和尿液中均未检出丁香酚的任何Ⅰ相代谢物；丁香酚仅以Ⅱ相代谢的结合产物排出体外.从而初步明确了AEE在体内的主要的代谢和排泄途径.