猪脂肪间充质干细胞的分离、鉴定以及Wnt信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用

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了解动物机体脂肪沉积的规律及其分子调控机理是顺利开展动物育种工作最关键的前提,同时也是科研工作者亟待解决的难题。本文旨在研究脂肪细胞转分化过程中可能存在的脂肪调控机制。为此,我们首先利用酶消化法成功分离得到猪脂肪间充质干细胞(ADSCs),并利用免疫组织化学和分子生物学方法检测细胞标记蛋白CD44的表达情况,CD44呈阳性表达,说明分离到的细胞是猪ADSCs。此后,利用成脂诱导剂对猪ADSCs进行诱导分化,利用定量PCR和Western blot检测APC1和APC2基因在脂肪细胞分化过程中的表达情况,发现APC1和APC2基因在脂肪细胞分化早期高表达,同时检测Wnt信号通路相关基因β-catenin、GSK3β和Axin基因在脂肪细胞分化过程中的表达,发现在分化过程中β-catenin的mRNA和蛋白水平都显著降低,GSK3β的表达趋势和APC的表达趋势是一致的,Axin则表现出先降低后升高的趋势,即在分化后期表达量升高。APC在脂肪形成中的作用可能是通过调节β-catenin而发挥作用进而调控脂肪细胞的分化过程。
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