【摘 要】
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目的 本研究对衡阳地区有症状宠物鸟中鹦鹉热衣原体(Cps)进行分离、鉴定和基因分型,为了解本地区Cps的流行病学特征,并对其进行致病性研究.方法 从200份可疑禽鸟肝组织标本中提取DNA作为模板,针对Cps特异性基因ompA设计特异性引物进行PCR扩增.PCR初筛阳性样本接种于Hep-2和Vero细胞,间接免疫荧光鉴定Cps包涵体.设计另一对ompA引物对PCR初筛阳性的标本进行扩增,测序后采用o
【机 构】
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南华大学医学院病原生物学研究所,湖南省分子靶标新药研究协同创新中心,湖南省特殊病原体重点实验室,衡阳421001
【出 处】
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21世纪第五届全国人兽共患病学术研讨会
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目的 本研究对衡阳地区有症状宠物鸟中鹦鹉热衣原体(Cps)进行分离、鉴定和基因分型,为了解本地区Cps的流行病学特征,并对其进行致病性研究.方法 从200份可疑禽鸟肝组织标本中提取DNA作为模板,针对Cps特异性基因ompA设计特异性引物进行PCR扩增.PCR初筛阳性样本接种于Hep-2和Vero细胞,间接免疫荧光鉴定Cps包涵体.设计另一对ompA引物对PCR初筛阳性的标本进行扩增,测序后采用ompA基因分型方法进行基因分型.为评价分离Cps禽鸟株的致病性以及BALB/c小鼠对其敏感性,采用不同剂量Cps鼻内接种BALB/c小鼠,不同天数后处死小鼠分离各组织,H&E染色和免疫组化分析炎症情况.结果 PCR初筛200份标本(134只鹦鹉,23只鸽子,43只其它)有8例Cps阳性,其中7例来源于鹦鹉,1例来源于相思鸟,阳性率约为4％.7株鹦鹉来源Cps禽鸟分离株接种Hep-2细胞与Vero细胞,均能成功培养.Vero细胞比Hep-2细胞更适合用来分离和培养Cps禽鸟株.另外,PCR阳性标本ompA基因分型发现,除不能进行培养的相思鸟来源分离株外,其它分离株均属于基因型A型.小鼠接种后证实Cps禽鸟分离株均能引起严重的肺炎和肺部炎症细胞的浸润,并呈剂量依赖性,其它组织免疫组化染色,心、肝、脾、肺、肾均有不同程度的Cps浸润,其中肺组织浸润炎症程度最重.结论 成功分离和培养了Cps禽鸟株,且衡阳地区Cps流行主要为A型,Cps禽鸟分离株在BALB/c小鼠感染过程中具有较强致病性,以肺部最严重,同时累及多个脏器组织病变.
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