单细菌水平蛋白质相互作用研究新方法

来源 :中国化学会第29届学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oqo235
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  细菌双杂交系统已被广泛应用于蛋白质相互作用研究。单个细菌水平的蛋白-蛋白相互作用研究有助于更准确地考察蛋白在活细胞中的相互作用状况,揭示传统生物化学检测手段中因集权平均而被掩盖的个体差异。本研究拟通过超高灵敏流式检测技术1与细菌双杂交系统的有机结合,借助双色免疫荧光染色法,发展灵敏、快速、高分辨、高通量的蛋白-蛋白相互作用定量研究新方法。利用超高灵敏流式分析技术,我们在单细菌水平同时对Flag或His标签标记的相互作用蛋白以及报告因子 -半乳糖苷酶进行定量检测。对一系列相互作用强度已知的蛋白En和Kn进行单细菌水平的蛋白表达定量分析,得到细菌双杂交系统中蛋白相互作用强度与报告基因表达量之间的内在联系,建立一种快速检测蛋白相互作用强度的新方法。
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