【摘 要】
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背景与目的：本实验研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人神经胶质瘤细胞U251的多药耐药(multi-drugresistance, MDR)性的影响.方法：体外构建了2对靶向多药耐药基因(MDR1)的siRNA和1对非特异siRNA,与阳离子脂质体构建转染复合体,转染至U251细胞株,荧光标记筛选转染条件;采用逆转录PCR(reverse transcri
【机 构】
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南京医科大学附属脑科医院研究所,江苏南京 210029 南京医科大学药学院药理教研室,江苏南京 2
【出 处】
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2007年全国生化与生物技术药物学术年会
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背景与目的：本实验研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人神经胶质瘤细胞U251的多药耐药(multi-drugresistance, MDR)性的影响.方法：体外构建了2对靶向多药耐药基因(MDR1)的siRNA和1对非特异siRNA,与阳离子脂质体构建转染复合体,转染至U251细胞株,荧光标记筛选转染条件;采用逆转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)和Western blot检测MDR1 mRNA和P-gp蛋白的表达。结果：各转染组RT-PCR显示MDR1 mRNA的表达水平均下降(P<0.05),在转染后48h下降较明显;Western blot显示P-gp的相对表达也明显降低(P<0.05)。结论 2对特异siRNA均能明显降低MDR1 mRNA和P-gp的表达,提示siRNA可多位点逆转U251细胞的多药耐药性,为提高胶质瘤的化疗有效率提供了一种新方法。
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目的：观察龙葵碱对HepG2细胞内caspase-3及Bcl-2蛋白含量的影响,阐明龙葵碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制。方法：采用激光共聚焦扫描显微术和Western blot法检测caspase-3和Bcl-2蛋白含量,并对二者在细胞内的位置进行定位。结果：龙葵碱能够显著升高HepG2细胞内caspase-3蛋白含量,降低Bcl-2的含量,并且均具有剂量依赖性.caspase-3蛋白和Bcl-2蛋
目的：建立模拟在体血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)并评价其形态、功能,为中枢神经系统药物的跨血脑屏障特性研究提供体外实验的模型依据。方法：将小鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovascular endothelial cells, BMVEC)、大鼠C6胶质瘤细胞分别接种于涂有明胶的Transwcll多聚碳酯膜内室和外室,进行非接触双室共培养,建立细胞培养基础上的
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本文以稳定表达RaplGAP基因的HeLa细胞株(HeLa-RaplGAP)为实验组,同时选用稳定表达空白质粒的HeLa细胞株(HeLa-GFP)和HeLa细胞为对照组,通过MTT法检测RaplGAP对HeLa细胞增殖的影响;通过细胞─基质粘附实验、划痕实验、体外细胞迁移实验,体外细胞侵袭实验研究RaplGAP对HeLa细胞粘附、迁移、侵袭能力的影响;并通过明胶酶谱技术检测细胞内MMP蛋白表达水平