论文部分内容阅读
将含Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶基因的工程菌（Ｅ．ｃｏｌｉ．ＤＨＩ／ｐＴＤ）在ＬＢ培养基中发酵培养，经ＩＰＴＧ诱导表达酶蛋白，菌体经破碎处理，硫酸铵沉淀，通过Ｓｅｐｈａｃｒｙ１ Ｓ－１００凝胶过滤和ＣＭ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ５０离子交换柱层析等步骤纯化，获得高活性Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶，达到电泳纯化，其分子量为９４ＫＤａ。１Ｌ细菌培养液可得约５×１０〈’５〉单位的Ｔａｑ酶。通过临床应用验证，使用该酶催化ＰＣＲ聚合酶链式反应，其性能稳定，扩增区带清晰可辨，证明该酶可作为一种耐热酶在ＰＣＲ技术中应用。