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目的：1、探索以内皮祖细胞体外培养和行为观察为基础的对烟雾病血管生成机制研究的实验方法；2、对比正常对照组,观察研究烟雾病患者外周血来源内皮祖细胞是否具备正常增殖、粘附、迁移能力.方法：1、实验组取2012年8月-2012年12月在华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科住院6名烟雾病患者术前外周血标本20ml,所选患者均因脑缺血或脑出血入院,行全脑DSA提示烟雾病,不伴有其他脑血管及血液系统、免疫系统疾病.对照组随机选择10名健康志愿者,抽取外周血标本20ml.2、体外单个核细胞诱导培养内皮组细胞(EPCs)：采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,M199为基础的,含胎牛血清、VEGF、bFGF培养基在人纤维连接蛋白包被培养板诱导培养EPCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态.采用DiI-ac-LDL、FITC-UEA-I荧光染色,激光共聚焦显微镜鉴定细胞类型.3、细胞功能检测：采用CCK-8试剂盒测定培养第3、6、9、12、15、18天细胞悬液OD值,制作细胞生长曲线,比较两组细胞悬液生长情况.取培养第7天细胞,使用划痕实验方法：比较实验组与对照组样品内EPCs迁移能力.取培养第7天贴壁细胞悬液行粘附实验,观察两组EPCs粘附能力差异.结果：1、外周血分离单个核细胞培养3天后,细胞增大,部分细胞不规则,培养7天后,镜下可见部分细胞形成不规则形长椭圆形,聚集呈团块或簇装,14天细胞集落增多,集落交界处细胞紧密排布贴附培养板.2、CCK-8试剂盒测定培养过程中细胞增殖,在9-12日增长速率最快,15日之后达到平台期,在9、12日实验组EPC增殖速率较对照组有降低,但进入平台期后,两组细胞增殖能力相近.使用细胞划痕法测定EPCs迁移能力,实验组EPCs迁移细胞数为26.67±2.33,对照组29.30±2.68,P=0.51,两者迁移能力无差异.粘附实验中实验组EPCs粘附细胞数为22.17±2.68,对照组20.60±2.18,P=0.85,两者粘附功能相似.结论：1、烟雾病成年患者外周血单个核细胞内经诱导培养可成功诱导分化内皮祖细胞.2、与正常对照组相比,来源于烟雾病患者外周血EPCs具备有和正常组EPCs相似的形态、增殖、迁移、粘附能力.3、烟雾病血管内膜明显增厚的特征性病变可能与病态血管所处环境多种调节因素有关,具备正常分化功能的EPCs在体内血管修复功能受影响,参与或促进了烟雾病病理过程.4、成年烟雾病患者体内储备有血管修复和再生潜力,及时行直接/间接颅内外血管吻合术改善局部血流将可能诱导更多新生血管生成,改善局部脑组织缺血症状.