【摘 要】
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从孵化7天的鸭胚生殖腺中分离得到原始生殖细胞(PGCs)集落，对这些PGCs进行分离培养获得EG细胞，并对其生物学特征进行研究，探索鸭EG细胞定向诱导分化为神经元样细胞和成骨细胞的方法.结果显示：EG细胞集落有典型的鸟巢状结构，有连续传代的能力(传至第11代).微生物污染检测呈阴性;核型检测表明EG细胞没有发生染色体二倍体结构的变异;碱性磷酸酶和糖原检测均呈阳性，EG细胞的特异性表面标志SSEA-
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100094;东北农业大学动物科技学院,哈尔滨 150000
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从孵化7天的鸭胚生殖腺中分离得到原始生殖细胞(PGCs)集落，对这些PGCs进行分离培养获得EG细胞，并对其生物学特征进行研究，探索鸭EG细胞定向诱导分化为神经元样细胞和成骨细胞的方法.结果显示：EG细胞集落有典型的鸟巢状结构，有连续传代的能力(传至第11代).微生物污染检测呈阴性;核型检测表明EG细胞没有发生染色体二倍体结构的变异;碱性磷酸酶和糖原检测均呈阳性，EG细胞的特异性表面标志SSEA-1，SSEA-4，TRA-1-60，TRA-1-81检测均呈阳性，EG克隆在RA诱导下可在体外分化形成典型神经元细胞，细胞呈现双极、多极、锥形和伸出突起并交织成网：当添加地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸后可在体外诱导为成骨细胞，成骨诱导后部分细胞胞体拉长、聚集成团、放射状排列，形成钙结节.运用茜素红染色和四环素荧光标记检测诱导细胞的矿物质沉积状况均呈阳性.脂质体介导转染pEGFP-N3，pEYFP-N1和pDsRed-N1荧光蛋白，转染表达率较高.从各个角度证明了培养的EG细胞的全能性.这种潜能使其有可能成为移植治疗人类各个系统疾病的种子细胞.
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