【摘 要】
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目的:构建乙型肝病炎毒(HBV)P基因分段重组原核表达质粒,获得蛋白的表达并进行纯化。方法:PCR扩增获得P 基因不同片段,分别双酶切后克隆至原核表达质粒pET28a,转化 E．coli DH5
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目的:构建乙型肝病炎毒(HBV)P基因分段重组原核表达质粒,获得蛋白的表达并进行纯化。方法:PCR扩增获得P 基因不同片段,分别双酶切后克隆至原核表达质粒pET28a,转化 E．coli DH5α,酶切鉴定得阳性重组质粒pET28a并测序;然后转化 E．coli BL21,IPTG诱导融合蛋白表达,薄层扫描分析表达蛋白组成;可溶性分析后用Ni2+-NTA凝胶亲和层析柱纯化、透析并浓缩融合蛋白,最后以Western Blot分析目的蛋白。结果:成功构建了HBV三个分段P基因的原核表达质粒,目的基因可高效表达, 表达产物主要以包涵体形式存在,Ni2+-NTA纯化可获得表达蛋白,Western Blot证实为目的蛋白。结论:HBV P基因截短分段可高效表达并得到纯化,为研究HBV的P蛋白功能和病毒复制奠定了基础。
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目的:研究、分析医院制剂质量管理和发展的具体模式。方法:运用文献分析方法、结合医院制剂的临床使用情况、医院制剂的质量管理状况,分析了医院制剂的质量管理与发展模式方
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