【摘 要】
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目的：探讨新型人源Kunitz型融合蛋白uPAg-KPI的抗卵巢癌作用及作用机制,为临床药物治疗卵巢癌提供新的途径.方法：(1)体外实验中采用MTT,CFU,Wound Healing,Transwell小室模型检测uPAg-KPI对卵巢癌SKOV3细胞生长和转移的影响；流式细胞术分析uPAg-KPI作用后细胞周期的变化；Western Blot检测uPAg-KPI作用后总ERK,总AKT以及P-
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目的：探讨新型人源Kunitz型融合蛋白uPAg-KPI的抗卵巢癌作用及作用机制,为临床药物治疗卵巢癌提供新的途径.方法：(1)体外实验中采用MTT,CFU,Wound Healing,Transwell小室模型检测uPAg-KPI对卵巢癌SKOV3细胞生长和转移的影响；流式细胞术分析uPAg-KPI作用后细胞周期的变化；Western Blot检测uPAg-KPI作用后总ERK,总AKT以及P-ERK, P-AKT表达.(2)构建人卵巢癌SKOV3细胞的裸鼠移植瘤模型,分为对照组、融合蛋白组、顺铂组、顺铂联合融合蛋白组.对比四组间移植瘤大小、重量及抑瘤率；同时应用免疫组化法检测P-ERK、P-AKT、PCNA、VEGF蛋白表达.结果：(1) uPAg-KPI对SKOV3细胞的抑制作用呈现时间和浓度依赖性,在uPAg-KPI浓度为0.5μg/μl,药物作用48h时可抑制率可达50％；给与uPAg-KPI治疗后的克隆形成数目、划痕区域细胞数以及穿模细胞数均较对照组明显降低,差异有统计学意义；uPAg-KPI用药后GI期细胞增加,S和G2/M期细胞百分比下降,细胞周期阻滞于分裂期之前；uPAg-KPI能下调P-ERK 1/2和P-AKT表达,总ERK和总AKT表达没有变化.(2) uPAg-KPI组裸鼠移植瘤的大小和重量均小于对照组；联合用药组抑瘤率高于顺铂组高于uPAg-KPI组(71.69％＞ 45.14％＞ 33.32％)；顺铂组、顺铂联合uPAg-KPI组与对照组比,体重下降明显,以顺铂组为著；uPAg-KPI组P-ERK、P-AKT、PCNA、VEGF蛋白表达水平较对照组显著降低.结论：uPAg-KPI对卵巢癌SKOV3细胞的生长和转移有抑制作用,抑制作用与P-ERK、P-AKT,PCNA,VEGF信号分子有关.uPAg-KPI在与顺铂联合使用时,能够增加疗效,减轻毒性.
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