【摘 要】
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本论文进行了抑癌基因PTEN在大肠杆菌中克隆的初步研究.首先以心肌的total RNA为底物,经逆转录-PCR反应,扩增出足够量的PTEN cDNA,再利用限制性内切酶、T4连接酶等为工具,在
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本论文进行了抑癌基因PTEN在大肠杆菌中克隆的初步研究.首先以心肌的total RNA为底物,经逆转录-PCR反应,扩增出足够量的PTEN cDNA,再利用限制性内切酶、T4连接酶等为工具,在低熔点凝胶反应体系中,把PTEN插入pGEM-3Z的多克隆位点上,经抗药性筛选、蓝白筛选,得到含有重组质粒pGEM-3Z-PTEN的菌株.将其培养,并从中提取质粒DNA,通过电泳、酶切等手段,验证了它是重组质粒而且PTEN基因的插入方向正确.
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