论文部分内容阅读
[目的]探讨miR-452在逆转人乳腺癌MCF-7/DOC细胞对多西他赛耐药性的作用及其可能的作用机制.[方法]应用实时荧光定量PCR法验证对多西他赛耐药的乳腺癌细胞MCF-7/DOC及其亲本细胞MCF-7中miR-452的表达差异,同时分别检测MCF-7和MCF-7/DOC转染miR-452模拟物和抑制物后的表达变化,用MTT法检测细胞转染后对多西他赛的耐药性变化,并用PCR法和蛋白质印迹法验证生物信息学预测的miR-452的靶基因IGF-1R,以探讨其可能的作用机制.[结果] MCF-7/DOC细胞中miR-452的相对表达量显著高于其亲本细胞MCF-7的表达量(78.86±21.89倍,t=3.88,P=0.02),MCF-7转染miR-452模拟物后,miR-452相对表达量显著高于其阴性对照组(212.15±50.08倍,t=11.13,P＜0.01),耐药性显著高于阴性对照组(实验组：1.98±0.11 μM,阴性对照组：0.85±0.08μM,P＜0.01),IGF-1R的mRNA和蛋白质水平显著低于其阴性对照组(mRNA水平：0.54±0.22倍,t=2.90,P=0.04).相反,MCF-7/DOC转染miR-452抑制物后,miR-452相对表达量显著低于其阴性对照组(0.58±0.07倍,t=8.00,P=0.02),耐药性显著低于阴性对照组(实验组：44.45±3.20μμM,阴性对照组：107.31 ±.6.63 μM,P＜0.01),IGF-1R的mRNA和蛋白质水平显著高于其阴性对照组(mRNA水平：50.90±4.16倍,t=53.76,P＜0.01).[结论]miR-452可能通过靶基因IGF-1R来改变多西他赛的耐药性.