【摘 要】
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本研究旨在以仔猪小肠上皮细胞系IPEC-1 为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin 定位与表达的影响,进而为揭示Ala-Gln 促进仔
【机 构】
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江西农业大学动物科技学院,江西南昌 330045
【出 处】
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2014年中国畜牧兽医学会养猪学分会学术研讨会
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本研究旨在以仔猪小肠上皮细胞系IPEC-1 为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin 定位与表达的影响,进而为揭示Ala-Gln 促进仔猪小肠黏膜屏障功能的作用机制提供理论依据.试验选取同代IPEC-1 细胞接种至6 孔细胞培养板,用含0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L Ala-Gln 的高糖DMEM 进行培养,待细胞生长融合达70%以上时进行免疫荧光定位和Western blot.结果表明,(1)不含Ala-Gln 的对照组细胞可见其胞质内团状的阳性荧光染色,而细胞间连接处阳性荧光染色不明显;随着Ala-Gln 含量的增加,试验组细胞间连接处阳性荧光信号逐渐增强,细胞轮廓更加完整,而胞质内荧光信号逐渐减弱;(2)各Ala-Gln 处理组IPEC-1细胞紧密连接蛋白Occludin 的表达量均显著高于对照组(P<0.01).随着Ala-Gln 含量的升高,Occludin的表达量呈先增后减的趋势.添加量为2.00 mmol/L 时Occludin 的表达量达到峰值,且显著高于其它处理组(P<0.01).由此可知,Ala-Gln 可以促进IPEC-1 细胞紧密连接蛋白Occludin 的表达,促进小肠上皮细胞间紧密连接结构的形成,进而维护仔猪小肠的屏障功能.
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