口蹄疫病毒Asia1型感染BHK-21细胞的定量蛋白组学分析及验证

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:superlhl2010
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口蹄疫病毒感染宿主细胞将引起细胞多个基因表达水平的改变.为了揭示口蹄疫病毒的致病机制及病毒宿主之间的相互作用关系,本研究以稳定标记的单型氨基酸定量蛋白组学方法(SILAC)结合LC-MS/MS及生物信息学分析,检测了口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型感染BHK-21细胞后的蛋白表达情况,结果确定了2 141个蛋白,其中153个蛋白在病毒感染8小时之后其表达水平有显著改变(57个蛋白表达水平上调,96个蛋白表达水平下调).应用IngenuityPathways分析,确定这些表达水平有差异的蛋白分别涉及细胞的生物过程、细胞成份及细胞分子生物功能等方面,并涉及14个调控网络(network).为了进一步验证这些表达水平有差异的蛋白可能与病毒的复制有关系,分别选择六个蛋白的干扰性RNA,并将其转染细胞后确定了各个蛋白对FMDV滴度的影响.这些结果显示,FMDV感染后,细胞中蛋白表达水平的改变是细胞与病毒间相互作用的适应性调节.本研究也进一步证实了定量蛋白组学SILAC方法结合LC-MS/MS,在病毒与宿主相互作用研究中的可行性及优势.
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