论文部分内容阅读
目的 华蟾素,一种在临床中被使用于治疗肿瘤的中国传统药物,从中华大蟾蜍的皮中提取.本研究的目的是探讨华蟾素诱导骨肉瘤细胞系U2OS凋亡的可能信号传导途径.方法 利用MTT法评价华蟾素对U2OS细胞的细胞增殖的影响,采用Hoechst 33258染色和流式细胞术分别检测分析细胞凋亡的形态学改变和细胞凋亡率、细胞周期分布.使用MitoCapture试剂染色检测线粒体膜电位变化(△ψM).Wnt荧光素酶报告基因检测U2OS中Wnt信号途径活性.免疫荧光法检测细胞核β-catenin的表达.RT-PCR方法检测Wnt信号抑制剂的表达.Western Blot方法检测凋亡相关蛋白的表达以及细胞色素C的释放.用以上相同方法同样检测华蟾素联合化疗药物处理的肿瘤细胞.