【摘 要】
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目的 近年报道肠道菌丛失调,特别是具核梭杆菌感染可能是结直肠癌(CRC)的病因之一,国内尚欠缺研究,本文探讨两者的相关性.方法 建立实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法：根据
【机 构】
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510180 广州医科大学附属广州市第一人民医院
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 近年报道肠道菌丛失调,特别是具核梭杆菌感染可能是结直肠癌(CRC)的病因之一,国内尚欠缺研究,本文探讨两者的相关性.方法 建立实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法：根据文献合成引物和探针,提取具核梭杆菌标准菌株基因组DNA (gDNA),用普通PCR扩增DNA目的片段并与pMD18-T vector连接,转化到感受态细胞中,构建含有目的基因序列的质粒作为标准模板,用TaqMan标记探针和ABI Stepone Plus系统进行FQ-PCR反应.构建荧光原位杂交(FISH)检测方法：采用具核梭杆菌作为阳性对照菌,金黄色葡萄球菌作为阴性对照菌,通用细菌探针EUB338、具核梭杆菌探针FUSO,对具核梭杆菌和金黄色葡萄球菌进行荧光原位杂交.用上述2种检测方法对手术切除且经病理学检查证实的101例腺癌患者的癌组织标本和配对正常组织标本进行检测,分析具核梭杆菌的富集度与临床病理指标的相关性.结果 2种检测方法均证实具核梭杆菌在CRC癌组织中富集,癌组织具核梭杆菌检出率为83.33％(88/101),其丰度在肿瘤组织的归一化值为0.242±0.034,显著高于正常组织的0.050±0.017(P＜0.01).具核梭杆菌高丰度与患者的性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、浸润程度、Dukes分期无显著相关性(P＞0.05),而与淋巴转移密切相关(1538.05±3071.64比212.87±939.08,P＜0.01).结论 具核梭杆菌在癌组织中富聚促进CRC的发生、发展和淋巴转移.
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