【摘 要】
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目的：从自然感染小鼠诺如病毒的小鼠中分离小鼠诺如病毒并进行鉴定。
方法：采用RAW264.7细胞从感染小鼠的盲肠内容物中分离病毒。电镜观察病毒形态。设计一对扩增小鼠诺如
【机 构】
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广东省实验动物重点实验室,广东省实验动物监测所,广州510260
【出 处】
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华东地区第十一届实验动物科学学术交流会暨实验动物规范化、标准化研讨会
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目的：从自然感染小鼠诺如病毒的小鼠中分离小鼠诺如病毒并进行鉴定。
方法：采用RAW264.7细胞从感染小鼠的盲肠内容物中分离病毒。电镜观察病毒形态。设计一对扩增小鼠诺如病毒核衣壳蛋白基因(VP1)特异性引物,应用RT-PCR方法对病毒分离株进行鉴定,并进行测序和序列比较分析。
结果：RAW264.7细胞接毒24～48h后表现出明显的细胞病变,表现为细胞圆缩、变亮、聚集,最后大部分细胞死亡脱落。电镜观察可见明显的病毒颗粒,颗粒呈球形,无囊膜,直径约30-35nm.应用RT-PCR扩增病毒VP1片段,扩增片段长度为1660bp,与预期结果相符,序列分析发现病毒分离株与GenBank中收录的其他分离株的核苷酸序列同源性为89.2～02.2％,氨基酸序列同源性为93.8～96.3%。进化树分析表明该病毒分离株属于诺如病毒属成员。
结论：分离株经鉴定确认为小鼠诺如病毒,命名为MNv GZ09K162分离株。
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