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目的 为了探讨microRNA 簇的生物学意义，建立microRNA 簇剔除胚胎干细胞模型。方法 运用生物信息学手段，确定6 个microRNA 簇基因组的序列，设计基因剔除策略，构建基因剔除载体，以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES 细胞，用G418 和Ganc 进行正负筛选，获得双抗性克隆，经PCR 和Southern blot 验证确定正确同源重组的microRNA 簇剔除胚胎干细胞，并对PCR 和Southern blot 验证方法进行比较。