【摘 要】
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目的 探讨Kir6.2在帕金森病发病机制中的作用及成为潜在治疗靶点的初步研究.方法 以PC12细胞为研究对象，第一步，将其分为三组，分别是正常组、转染Kir6.2质粒组和转染空载体
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院神经科,上海交通大学医学院神经病学研究所,上海200025
【出 处】
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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五届会员代表大会
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目的 探讨Kir6.2在帕金森病发病机制中的作用及成为潜在治疗靶点的初步研究.方法 以PC12细胞为研究对象，第一步，将其分为三组，分别是正常组、转染Kir6.2质粒组和转染空载体组.首先在转染Kir6.2质粒48 h后，用细胞免疫荧光方法观察三组细胞中Kir6.2的表达，然后用Western blot检测三组细胞中Kir6.2蛋白的表达情况，之后用WST-1检测三组细胞对不同浓度梯度下鱼藤酮处理24 h后的细胞活力，确定Kir6.2在细胞中的作用.第二步，设计siRNA对Kir6.2进行干扰，实验分正常组、干扰组和空转组，然后用上述细胞免疫荧光和Western blot方法检测Kir6.2在细胞中的表达，用WST-l检测Kir6.2被干扰后三组细胞在相同浓度梯度鱼藤酮处理24 h后的细胞活力，确定Kir6.2在细胞中的作用，进而确定Kir6.2在帕金森病发病机制中的作用.明确Kir6.2的作用后，用Western blot方法检测鱼藤酮处理前后细胞内PKC的变化，以及应用PKC激动剂和抑制剂后细胞活力的变化，以确定Kir6.2发挥作用的通路和作用的靶点.结果 第一步中细胞免疫荧光结果和Western blot结果显示，转染组Kir6.2在细胞中表达较正常组和空转组明显增高，细胞活力检测发现Kir6.2组细胞活力较其他两组增高；第二步中Kir6.2干扰后，细胞免疫荧光和Western blot结果显示干扰组Kir6.2表达较正常组和空转组降低，细胞活力检测显示干扰组细胞活力较其他两组降低.结论 Kir6.2对鱼藤酮处理的PC12细胞具有保护作用，从而确定Kir6.2可能对帕金森病发病具有保护作用，其保护机制与PKC激活有关.
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