【摘 要】
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目的:构建以bmD-2为药物作用靶点的药物筛选模型并进行药物筛选。
方法:应用基因工程及细胞工程方法构建以小鼠bmp-2远端启动子与荧光素酶报告基因相连的质粒,转染小鼠MC3T
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目的:构建以bmD-2为药物作用靶点的药物筛选模型并进行药物筛选。
方法:应用基因工程及细胞工程方法构建以小鼠bmp-2远端启动子与荧光素酶报告基因相连的质粒,转染小鼠MC3T3-E1颅骨细胞,以荧光素酶表达量评价6mp-2启动子活性,通过测定模型荧光强度筛选上调BMP-2表达的活性物质,应用所选模型,对合成化合物库及微生物发酵产物库进行高通量筛选,对筛得的活性物进行结构鉴定,对活性物产生菌进行分类鉴定。
结果:该模型可用于抗骨质疏松药物的筛选,由菌株04-5195发酵液中筛得上调bmp-2启动子活性物质Amicoumacin B,菌株04-5195被鉴别为诺卡菌属中一个新种。
结论:应用所构建筛选模型筛得活性物质产生菌株04-5195,该活性物质被命名为04-5195A,经结构鉴定为Amicoumacin B,AmicoumacinB具有上调bmp-2启动子的活性。
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