【摘 要】
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目的 研究肝细胞核因子1α(HNF1α)对HuH7细胞长链非编码核糖核酸(lncRNA)表达谱的影响及其与HNF1A-AS1的相互调控作用.方法 利用慢病毒载体上调或下调HuH7细胞中HNF1α
【机 构】
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200433 上海长征医院消化内科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 研究肝细胞核因子1α(HNF1α)对HuH7细胞长链非编码核糖核酸(lncRNA)表达谱的影响及其与HNF1A-AS1的相互调控作用.方法 利用慢病毒载体上调或下调HuH7细胞中HNF1α的表达,借助Agilent Human lncRNA 4×180K芯片分析HNF1α对IncRNA基因表达谱的影响；实时荧光定量PCR验证HNF1α对lncRNA的表达调控作用；染色质免疫共沉淀实验研究HNF1a对HNF1A-AS1的转录调控作用；利用慢病毒载体或小干扰核糖核酸介导HNF1A-AS1表达上调或下调以研究HNF1AAS1对HNF1α的调控作用；CCK-8法检测HNF1A-AS1对肝癌细胞增殖能力的影响,成瘤实验研究HNF1A-AS1对肝癌细胞体内成瘤能力的影响实时PCR检测HNF1α、HNF1A-AS1在人肝癌组织中的表达,并用Spearman等级相关系数分析两者间的相关性.结果 HNF1α能正向调控HNF1A-AS1、XLOC006277、XLOC-006645等7个lncRNA的表达.染色质免疫共沉淀实验发现HNF1α能够结合HNF1AAS1的启动子区域转录激活其表达.反之,HNF1A-AS1能够调节HNF1α的表达.细胞学实验表明过表达HNF1A-AS1可抑制肝癌细胞的增殖,同时体内成瘤实验表明HNF1A-AS1能够明显抑制肝癌细胞的体内成瘤能力.另外HNF1A-AS1与HNF1α在肝癌组织中的表达呈正相关(r=0.7414,P＜0.01).结论 HNF1α能正向调控HuH7细胞中HNF1A-AS1、XLOC-006277、XLOC-006645等7个lncRNA的表达,同时与HNF1A-AS1存在相互作用共同调控肝癌的发生、发展.
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