布鲁氏菌VirB5基因的原核表达及生物信息学分析

来源 :中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kwzheng
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本研究拟通过对羊种布鲁氏菌的VirB5基因在大肠杆菌中进行原核表达以及生物信息学分析,得到高效表达并且抗原性较好的蛋白,为进一步探讨布鲁氏菌VirB5蛋白的功能及其如何影响布鲁氏菌胞内生存奠定理论基础。成功构建了pET-32a-VirB5重组表达载体,经诱导表达后获得在大肠杆菌中表达的蛋白,大小约为45kDa,经Western Blot验证表达重组蛋白对布鲁氏菌阳性血清具有反应原性。生物信息学分析结果显示,理化性质分析该蛋白总平均亲水性值(GRAVY)为-0.604,为亲水性蛋白。蛋白三级结构预测结果与TRAC蛋白序列有27.23%的序列相似性。保守结构域结果分析显示,第30-69位氨基酸之间含有一个交织螺旋结构域,推测VirB5蛋白在内吞体膜上网格状结构的形成有重要作用,为布鲁氏菌的胞内生存提供有利条件,为后期布鲁氏菌毒力的测定和胞内生存机制研究奠定理论基础。
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