【摘 要】
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目的：基于差异microRNAs(miRNAs)表达探讨扶正化瘀方(FZHY)抗肝纤维化的作用机制.方法：CCl4皮下注射复制小鼠肝纤维化模型,分为正常组、模型组及FZHY组：自造模前3天开始给药
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院,上海中医药研究院肝病研究所,上海,201203,上海中医药大学附属曙光医院,上海中医药研究院肝病研究所,上海,201203
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目的：基于差异microRNAs(miRNAs)表达探讨扶正化瘀方(FZHY)抗肝纤维化的作用机制.方法：CCl4皮下注射复制小鼠肝纤维化模型,分为正常组、模型组及FZHY组：自造模前3天开始给药,每日1次,共8周.天狼星红染色及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量测定观察肝组织胶原沉积.应用miRNAs芯片检测各组小鼠肝脏miRNAs表达谱.基于miRNAs表达谱筛选出正常组、FZHY组与模型组相比具有相同变化趋势的差异miRNAs,并以Real-timePCR进行验证.对这些miRNAs可能调控的靶基因进行信号通路分析,发现其调控的显著性通路及通路对应的基因.最后以TGF-β1诱导原代培养4 d的大鼠肝星状细胞(HSC)活化,观察FZHY方对HSC活化及预测的靶基冈及相关信号通路的影响.结果：筛选出3个正常组、FZHY组与模型组比较表达下调的miRNAs,分别为：mmu-miR-322,mmu-miR-342-3p,mmu-miR-296-5p.Pathway分析发现TGF-β1信号转导通路为差异miRNAs靶基因的显著性信号通路,Smad7为映射到该通路的mmu-miR-322的靶基因.扶正化瘀方可下调TGF-β1诱导的原代培养4 d的HSC活化,上调Smad7蛋白表达,抑制Ti3R-I表达及Smad3核转位.结论：差异miRNAs可用于中药复方作用机制的研究；扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制可能与下调mmu-miR-322、mmu-miR-296-5p表达有关；下调mmu-miR-322从而上调Smad7表达,抑制TGF-β1／Smads信号通路可能是扶正化瘀方抗肝纤维化的部分作用机制.
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