【摘 要】
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枯草芽胞杆菌培养过程中的自溶严重影响其生物量。本研究采用多基因失活方法,期望以此来提高其生物量。我们以枯草芽胞杆菌168菌株为材料,选取了以下几个自溶相关的基因：x
【机 构】
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武汉大学生命科学学院 微生物遗传实验室 430072
【出 处】
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中国微生物学会第二届全国芽胞杆菌研究与应用学术研讨会
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枯草芽胞杆菌培养过程中的自溶严重影响其生物量。本研究采用多基因失活方法,期望以此来提高其生物量。我们以枯草芽胞杆菌168菌株为材料,选取了以下几个自溶相关的基因：xpf(原噬菌体PBSX中RNA聚合酶(δ)类似因子)；skfA(原噬菌体prophage 1中芽胞形成杀伤因子)；lytC(营养期主要自溶酶)；sdpC(芽胞形成延迟蛋白)；yqxG-yqxH-CwlA(原噬菌体skin中自溶酶基因片段)。利用载体pNNB194构建了一系列突变体,考察了它们对细胞自溶的抑制作用。结果表明ΔskfA、ΔlytC、ΔsdpC或Δxpf都能有效地抑制细胞自溶,其中ΔskfA抑制细胞自溶的效果最好,而ΔyGlA对细胞的自溶活性没有影响。我们得到的抑制枯草芽胞杆菌细胞自溶的最佳策略：突变体ΔskfAΔsdpC抑制细胞自溶的效果最好。对五个基因分别进行的回补实验发现：通过回补ΔlytC、ΔyGlA能够回复表型,ΔsdpC在一定程度上恢复表型,但Δxpf、ΔskfA不能回复表型,RT-PCR结果显示xpf、skfA与其下游基因在同一转录本中,基因敲除可能引起极性效应。
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