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Crustin是一种阳离子型、富含半胱氨酸残基的抗菌肽,其C-末端含有一个wAP结构域.与已经报道的血液中PtCrustin不同,本研究从三疣梭子蟹的眼柄cDNA文库中克隆得到了两种新的crustin基因(PtCrustin2和PtCrustin3).两种PtCrustins具有一致的半胱氨酸模式,被认为是Ⅰ型crustins.在PtCrustin3基因组DNA序列中鉴定出4个外显子和3个内含子,而PtCrustin2中有3个外显子和2个内含子.通过对8个样品的直接测序,在PtCrustin2基因组DNA片段中检测到了23个SNP位点,包括16个转换,4个颠换和3个插入缺失,其中9个存在内含子中,3个在编码的外显子中,11个在非编码外显子中.在3个样品的PtCrustin3基因组DNA片段中,检测到了8个SNP位点,包括4个转换,4个颠换,其中6个SNP位于内含子中,2个在编码外显子中.PtCrustin2和PtCrustin3 mRNA转录本主要在眼柄和鳃中检测到,而不是在血细胞中.在三疣梭子蟹受到溶藻弧菌、藤黄微球菌和毕赤酵母刺激后,PtCrustin2和PtCrustin3基因的表达量随时间变化明显,PtCrustin3比PtCrustin2更敏感.与大多数crustins不同,重组的PtCrustin2和PtCrustin3对革兰氏阳性菌藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌都有抑菌活性.此外,PtCrustin2对真菌毕赤酵母有一定的抑菌效果;PtCrustin3对革兰氏阴性菌溶藻弧菌具有显著的抑菌活性.以上结果表明,PtCrustin2和PtCrustin3是两种新的crustin,并且在三疣梭子蟹对抗病原刺激过程中发挥重要的免疫功能.