【摘 要】
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丙型肝炎病毒是引起慢性肝脏疾病的主要病原,亟需发展一种有效的药物或疫苗,但由于病毒高度变异性等因素,HCV疫苗研究成为当今生命科学研究中的难题.本研究在以往研究的基础
【机 构】
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军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
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丙型肝炎病毒是引起慢性肝脏疾病的主要病原,亟需发展一种有效的药物或疫苗,但由于病毒高度变异性等因素,HCV疫苗研究成为当今生命科学研究中的难题.本研究在以往研究的基础上,通过大量的文献和网上有关数据库检索,在HCV基因较保守的区段,选出了多段T细胞表位较密集的片段,加以连接组合,获得了具有HLA-A1,A2,A3,A24,B7和HLA-DR等多种表位的嵌合基因(HCV-T),经克隆到原核表达载体pBVIL1获得HCV-T重组蛋白质免疫原;克隆到真核表达载体pcDNA3.1,并经鉴定证明在Sp2/0可有效表达,获得了符合要求的pcDNA/HCV-T质粒免疫原.以Balb/c小鼠为实验动物,随机分组免疫动物,结果证明两种免疫原均具有免疫原性.尤其重组HCV-T在和抗HCV-C单克隆抗体(抗免疫原中的一个片段)一起注射时,通过抗体的介导作用,可以有效地激发机体的细胞免疫(CTL)反应;以pcDNA/HCV-T质粒免疫原首次免疫后再以重组HCV-T加强免疫组,也可以有效激发免疫机体的细胞免疫反应.总之,成功获得了HCV多表位嵌合重组蛋白质免疫原和重组质粒免疫原,为进一步研究HCV疫苗奠定基础.
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