猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建及其在AD-293细胞中的表达

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bb790858108
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参考GenBank发表IL-15mRNA序列设计引物,用RT-PCR方法扩增猪IL-15基因,并克隆到pMD18-T载体中,通过PCR、酶切和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA-pIL-15。在脂质体介导下,用重组质粒pcDNA-pIL-15转染AD-293细胞。以鼠抗猪IL-15为一抗,用间接免疫荧光分析表明猪IL-15基因均在AD-293细胞中成功进行了瞬时表达,为进一步研制猪IL-15基因佐剂疫苗及进行临床实验奠定了基础。
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