【摘 要】
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为建立一种快速检测伪狂犬病病毒(PRV)野毒的荧光定量PCR 方法.根据PRV-gE基因序列设计1 对特异性引物,构建含有PRV-gE 基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为
【机 构】
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北京农学院动物科学技术学院,北京 102206
【出 处】
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2014年中国畜牧兽医学会养猪学分会学术研讨会
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为建立一种快速检测伪狂犬病病毒(PRV)野毒的荧光定量PCR 方法.根据PRV-gE基因序列设计1 对特异性引物,构建含有PRV-gE 基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板来建立定量检测PRV-gE 的SYBR GreenⅠreal-time PCR 方法.结果显示,该方法的标准曲线的决定系数达0.9997,显示出优良的线性关系;最低可准确检测69copies/μL 的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2%;对猪圆环病毒、猪细小病毒、猪细环病毒等的检测结果均为阴性;对临床样品的检出率高于常规PCR 方法.结果表明,建立的PRV-gE 基因荧光定量PCR 方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于PRV 野毒感染的检测与定量分析.
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