【摘 要】
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本研究以日本血吸虫为研究对象,用现代分子生物学技术分析血吸虫体内该酶编码基因的结构,并确定其分类及在日本血吸虫生殖过程中的功能.结果:通过RACE-PCR的方法克隆获得S.j-
【机 构】
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农业微生物国家重点实验室、华中农业大学动物医学院 武汉430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究以日本血吸虫为研究对象,用现代分子生物学技术分析血吸虫体内该酶编码基因的结构,并确定其分类及在日本血吸虫生殖过程中的功能.结果:通过RACE-PCR的方法克隆获得S.j-stp1的全长ORF,其含有969bp,编码322aa；通过对其氨基酸序列分析发现其不仅具有蛋白磷酸酶(PPs)的特征序列,并具有PPs特异性抑制剂的结合位点；通过Real-time PCR方法检测到该基因在日本血吸虫28-49天的雌雄虫中均有表达,并且其在雄虫中表达水平要明显高于雌虫中的表达水平；通过体外培养合抱实验,发现该基因在单性培养的雌雄虫体内的表达水平都要高于合抱培养的雌雄虫的水平,且在将单性培养的雌雄虫重合抱后,S.j-stpl基因的表达水平又有上升；通过dsRNA浸泡法进行行RNA干扰实验,结果显示该方法能有效抑制日本血吸虫S.j-stp1的表达水平,干扰效果达到90％以上.本研究发现为进一步研究S.j-stpl在血吸虫生殖细胞发育和雌雄合抱过程中的作用奠定基础.
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