目的：以中国人马凡综合征C1037del型突变为基础,设计并构建针对此突变FBNl基因mRNA的特异性RNA干扰质粒载体,研究此栽体通过在人体细胞中有效介导RNA干扰,发挥对目的基因高效且特异的抑制作用。同时,初步探讨C1037del位点作为RNA干扰治疗马凡综合征有效靶位点的可行性。 方法：采用携带H1启动子的pBSHHl质粒,设计并构建可有效表达发夹状RNA的特异性RNA干扰裁体(pGi,pEi,pMi)。同时,为了利用绿色荧光蛋白的报告基因作用,构建包含C1037del位点序列和包含正常FBNl基因相应序列的融合蛋白表达质粒。在阳离子脂质体介导下,通过共转染人HTl080细胞株,流式细胞仪分析、检测荧光表达的变化,来研究RNA干扰pBSHHl裁体的有效性,以及C1037del位点的位置效应。 结果：限制性内切酶酶切图谱和DNA测序结果显示,构建的RNA干扰pBSHHl裁体和EGFP融合蛋白表达质粒均符合实验设计要求。细胞水平共转染实验结果表明,EGFP融合蛋白质粒均可表达出绿色荧光。构建的RNA干扰戢体pGi对融合蛋白质粒的荧光表达可产生高效的RNA干扰抑制作用,最大效率超过50％；pEi可特异性对含有EX片段的pEX-NI发挥抑制作用,但对pEx-C1无明显抑制作用； pMi对含有MU片段的pMU-N1和pMU-C1的荧光表达均未表现出明显的RNA干扰抑制作用。 结论：RNA干扰可高效且特异地抑制目的基因的表达。pBSHHl质粒是一种可在人体细胞中有效表达的RNA干扰载体。通过研究C1037del靶位点,结果表明RNA干扰存在位王效应。