【摘 要】
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背景:小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)系IP14D-1可分化为诱导性原始生殖细胞(induced Primordial germ cells,iPGCs).如何在体外得到相对纯化iPGCs并进一步扩增培养成为该研究领域的关键.目的:采用免疫磁珠分选方法(magnetic activated cell sorting,MACS)获取假定iP
【机 构】
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北京大学深圳医院男性生殖与遗传重点实验室 深圳518036
【出 处】
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广东省医学会第二次生殖医学学术会议
论文部分内容阅读
背景:小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)系IP14D-1可分化为诱导性原始生殖细胞(induced Primordial germ cells,iPGCs).如何在体外得到相对纯化iPGCs并进一步扩增培养成为该研究领域的关键.目的:采用免疫磁珠分选方法(magnetic activated cell sorting,MACS)获取假定iPGCs并鉴定.方法:IP14D-1细胞分化形成iEBs(induced Embryoid bodies,iEBs)并制成单细胞悬液,间接免疫磁珠法分选得到SSEA-1阳性细胞,即为假定iPGCs.结果:分选得到的假定iPGCs其生殖细胞特异标志TNAP(Tissue-Nonspecific Alkaline Phosphatase)染色为阳性;免疫荧光显示分选细胞表达PGCs特异性分化标志Blimpl,而且仍表达绿色荧光Oct-GFP,说明维持其筛选标志;4d、7d和9d iEBs分离的iPGCs细胞群经培养扩增后阳性率分别为67.1％、83.5％和71.9％.结论:采用MACS方法分选7diEBs来源的iPGCs较为合适.
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